可视化单细胞分选系统

可视化单细胞分选系统

基于GRID技术、高通量、高自动化的单细胞可视化分选系统。isoPick采用微射流技术，利用界面张力对细胞培养基（或干细胞涂层）进行重塑，在培养皿上雕刻出单独的细胞腔室GRID。isoPick可以在 6 厘米培养皿上创建 256 个单细胞腔室GRID阵列，并将细胞以纳升体积全自动地分配到各个 GRID 单细胞腔室中，通过isoPick的光学显微镜可以清楚地看到 GRID 室中的单细胞。基于GRID技术和光学成像信息，isoPick可以确保分选出的细胞100%为单细胞

特点

- 全自动化流程

- 操作简单，对细胞无损伤

- 结果可追踪

- 分离效率高达100%

- 直接转移到PCR管或96孔板

- 结构紧凑，体积小

优势：
传统单细胞分离手段无法保证所得的样品内只有一个单细胞，有可能有多个细胞或细胞团，导致下游的实验出现误差。

采用的GRID技术结合图像信息分析，结果可追踪，保证100%准确的单细胞分选。

而且isoPick分选条件温和，可以显著提高分选单细胞的存活率。

同时isoPick可将单细胞样品按照特定的体积直接转移到96孔板或PCR管中，无缝衔接单细胞下游应用，确保后续单细胞组学信息完整性。

可视化单细胞分选系统

人类诱导多能干细胞(hiPSCs)的单细胞克隆

人类诱导多能干细胞(hiPSCs)构建单克隆细胞系培养步骤繁琐，细胞对异常的处理和操作非常敏感，

传统单细胞分选容易导致细胞和遗传毒性应激的积累，进而导致不良分化和多能性丧失。

使用isoPick可以温和、自动地将人类诱导多能干细胞(hiPSCs)进行单细胞分选，以高效率培养hiPSCs单克隆细胞系，显著提高了细胞分离与克隆效率。

K562细胞单细胞测序

传统单细胞测序需对单细胞进行全基因组扩增（WGA），但传统单细胞WGA受限于如何获得单个细胞并转移到小体积的WGA反应中。

使用isoPick自动将K562细胞拾取并转移至含3.5 µl scWGA试剂的PCR管中，并无缝衔接scWGA反应。琼脂糖凝胶电泳结果显示（下图），单细胞WGA的DNA样本(+)中两种基因均被特异性扩增，而阴性对照(-)没有这两种扩增产物，符合预期。

Prime 编辑使用与逆转录酶融合的 Cas9 切口酶，将 DNA 序列从“Prime 编辑"引导 RNA (pegRNA) 复制到特定基因座。通过Prime 编辑将多XI环素诱导型 Prime Editor 蛋白 (PE2) 整合到 iPSC 细胞系的AAVS1 基因组，之后使用isoPick分选转入靶基因的hiPSCs细胞系，以确保细胞的单克隆性。（见上图）

胶质母细胞瘤（GBM）通过表观遗传免疫编辑获得骨髓相关转录程序以引发免疫逃逸

研究人员通过将多形性胶质母细胞瘤干细胞 (GSC) 连续移植到免疫活性宿主中，发现 GSC 通过建立增强的免疫抑制肿瘤微环境来免疫逃逸。从机制上讲，GSC通过表观遗传免疫编辑过程引起，其在免疫攻击后强制执行 GSC 中稳定的转录和表观遗传变化。研究中使用Irf8敲除细胞系实验证明，Irf8的激活是细胞免疫逃逸的一个重要因素，且在体内可能通过IFNγ介导的激活发生。该研究使用isoPick构建Irf8克隆敲除系